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Technical articles賽默飛細(xì)胞計(jì)數(shù)儀介紹
細(xì)胞計(jì)數(shù)是細(xì)胞培養(yǎng)和生物研究中的一項(xiàng)基礎(chǔ)操作,廣泛應(yīng)用于科研、藥物開(kāi)發(fā)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)等多個(gè)領(lǐng)域。隨著實(shí)驗(yàn)室自動(dòng)化水平的提高,自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀逐漸替代了傳統(tǒng)的血球計(jì)數(shù)板與顯微鏡手動(dòng)計(jì)數(shù)。賽默飛世爾科技(Thermo Fisher Scientific)推出的細(xì)胞計(jì)數(shù)儀系列,為科研人員提供了一種高效、便捷且一致性強(qiáng)的細(xì)胞計(jì)數(shù)解決方案。
賽默飛提供多款型號(hào)的細(xì)胞計(jì)數(shù)儀,包括Countess™ II FL熒光細(xì)胞計(jì)數(shù)儀和Countess™ II自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀。這些設(shè)備采用成像技術(shù)和圖像分析算法,能夠自動(dòng)識(shí)別細(xì)胞并進(jìn)行計(jì)數(shù),同時(shí)評(píng)估細(xì)胞活力和大小等參數(shù)。
相比傳統(tǒng)方法,這些設(shè)備在減少主觀誤差、提升重復(fù)性和節(jié)省時(shí)間方面具有明顯優(yōu)勢(shì)。借助可視化界面和即插即用的操作方式,即便是沒(méi)有經(jīng)驗(yàn)的操作人員也能迅速上手。
成像與分析技術(shù)
賽默飛細(xì)胞計(jì)數(shù)儀內(nèi)置攝像系統(tǒng),可采集高分辨率圖像,并結(jié)合圖像分析算法,對(duì)圖像中的細(xì)胞進(jìn)行識(shí)別和分類。熒光型號(hào)的Countess™ II FL配備兩個(gè)熒光通道和一個(gè)明場(chǎng)通道,適用于多種染料標(biāo)記細(xì)胞的檢測(cè),如使用Trypan Blue評(píng)估細(xì)胞活力,或使用Hoechst、GFP等標(biāo)記核酸和蛋白。
多種計(jì)數(shù)模式
設(shè)備支持細(xì)胞活力評(píng)估、熒光細(xì)胞計(jì)數(shù)、細(xì)胞大小分布、團(tuán)聚分析等多種功能,滿足多樣化實(shí)驗(yàn)需求。通過(guò)預(yù)設(shè)和自定義的分析參數(shù),用戶可以根據(jù)不同細(xì)胞類型和實(shí)驗(yàn)條件調(diào)整靈敏度、大小閾值等設(shè)置。
操作簡(jiǎn)便
大多數(shù)賽默飛細(xì)胞計(jì)數(shù)儀具備觸控屏幕,圖形化界面清晰明了。用戶只需加載樣本至專用計(jì)數(shù)載片,插入儀器,幾秒鐘內(nèi)即可獲取計(jì)數(shù)結(jié)果。設(shè)備可存儲(chǔ)歷史數(shù)據(jù),并支持U盤導(dǎo)出,方便數(shù)據(jù)管理和記錄。
樣本兼容性強(qiáng)
無(wú)論是貼壁細(xì)胞消化后懸液、懸浮細(xì)胞,還是經(jīng)過(guò)染色的細(xì)胞樣本,賽默飛細(xì)胞計(jì)數(shù)儀均可兼容。設(shè)備分析范圍通常在5–60 μm細(xì)胞直徑,適用于常見(jiàn)哺乳動(dòng)物細(xì)胞,如HEK293、CHO、Jurkat、RAW264.7等。
可更換耗材與維護(hù)簡(jiǎn)便
細(xì)胞計(jì)數(shù)儀采用一次性計(jì)數(shù)載片設(shè)計(jì),避免樣品交叉污染,同時(shí)清潔方便。設(shè)備本身結(jié)構(gòu)緊湊,日常維護(hù)簡(jiǎn)單,只需定期清潔鏡頭和通道區(qū)域。
細(xì)胞培養(yǎng)質(zhì)量監(jiān)測(cè)
細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,定期檢測(cè)細(xì)胞密度與活力至關(guān)重要。通過(guò)自動(dòng)計(jì)數(shù)儀,科研人員可以快速判斷細(xì)胞是否處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,進(jìn)而決定傳代、凍存或繼續(xù)培養(yǎng)。
藥物篩選與毒理實(shí)驗(yàn)
在進(jìn)行藥物敏感性測(cè)試時(shí),準(zhǔn)確掌握細(xì)胞數(shù)量和狀態(tài)有助于數(shù)據(jù)的可靠性。Countess™ II FL等型號(hào)支持熒光標(biāo)記檢測(cè),可對(duì)凋亡、壞死等狀態(tài)細(xì)胞進(jìn)行分類分析。
細(xì)胞治療與流式前處理
在免疫細(xì)胞治療和CAR-T制備過(guò)程中,細(xì)胞計(jì)數(shù)和純度評(píng)估至關(guān)重要。賽默飛細(xì)胞計(jì)數(shù)儀作為流式細(xì)胞儀前的樣本預(yù)處理工具,可以提高實(shí)驗(yàn)效率和標(biāo)準(zhǔn)化水平。
科研數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化
自動(dòng)計(jì)數(shù)結(jié)果具有更強(qiáng)的一致性和可重復(fù)性,適合科研論文撰寫和數(shù)據(jù)比對(duì)需求。使用圖像保存和分析報(bào)告導(dǎo)出功能,研究人員可以清晰記錄每次實(shí)驗(yàn)的具體參數(shù)與結(jié)果。
特性 | 血球計(jì)數(shù)板 + 顯微鏡 | 賽默飛細(xì)胞計(jì)數(shù)儀 |
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操作復(fù)雜度 | 需要手動(dòng)調(diào)整焦距和計(jì)數(shù),主觀性高 | 操作簡(jiǎn)便,自動(dòng)圖像識(shí)別 |
重復(fù)性 | 操作者不同可能產(chǎn)生差異 | 重復(fù)性強(qiáng),誤差小 |
分析參數(shù) | 多為總數(shù)與活細(xì)胞比例 | 可測(cè)定大小、熒光、形態(tài)等多個(gè)指標(biāo) |
數(shù)據(jù)保存 | 手工記錄為主 | 可數(shù)字化存儲(chǔ)與導(dǎo)出 |
處理速度 | 慢,適合少量樣本 | 快速,適合高通量實(shí)驗(yàn) |
樣本準(zhǔn)備
計(jì)數(shù)前應(yīng)確保細(xì)胞充分分散,避免團(tuán)聚。染色后應(yīng)靜置1–2分鐘,使染料與死細(xì)胞充分結(jié)合。推薦使用Trypan Blue或PI等染料,根據(jù)不同實(shí)驗(yàn)需求選擇合適方案。
載片使用
應(yīng)使用配套的專用載片,避免反復(fù)使用導(dǎo)致刮痕和污染。部分型號(hào)也支持可重復(fù)使用的玻璃計(jì)數(shù)載片,但需清潔。
鏡頭與光學(xué)系統(tǒng)維護(hù)
定期清潔儀器鏡頭表面,可使用無(wú)塵布和光學(xué)清潔液。避免在高溫高濕或強(qiáng)光下長(zhǎng)期存放儀器。
軟件更新與校準(zhǔn)
設(shè)備軟件應(yīng)保持更新,以獲取最新的算法和功能改進(jìn)。若出現(xiàn)識(shí)別偏差,應(yīng)檢查照明系統(tǒng)和圖像處理參數(shù)是否設(shè)置正確。
賽默飛細(xì)胞計(jì)數(shù)儀作為一種實(shí)驗(yàn)室常用工具,為細(xì)胞分析工作提供了可靠的支持。其自動(dòng)化程度和數(shù)據(jù)一致性使其適用于從日常細(xì)胞培養(yǎng)到復(fù)雜科研項(xiàng)目的多種需求。通過(guò)合理選擇設(shè)備型號(hào)、科學(xué)使用與維護(hù),科研人員可以在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中提升效率與數(shù)據(jù)質(zhì)量,促進(jìn)研究進(jìn)展。